NIBSC18/164國際標準品ATDB102基因組材料的使用:
重構前,不應嘗試稱量凍干材料的任何部分
a、 按照上文第6節所述打開安瓿。
b、 在室溫下用100μl無核酸酶水重新配制凍干材料。
c、 使用移液管將樣品轉移到無核酸酶試管中,確保收集到最大可用體積。
d、 讓材料在室溫下復原1小時,并用移液管充分混合。現在,1x Tris-EDTA緩沖液中的DNA濃度約為50ng/µl,但建議在使用前使用自己的定量方法進行確認。不應擔心材料中可能出現白色斑點。
e、 該材料可用作野生型對照和優選的稀釋劑,以產生材料18/118和18/130的任何選擇的變異百分比的標準品(2019年HCT 15和MOLT-4癌癥基因組第一國際標準);有關如何將其用作稀釋劑的詳細信息,請參見相關的使用說明。如果沒有足夠的材料18/164可用于進行稀釋,可將替代的野生型gDNA與材料18/1164對齊并用作稀釋劑,即應確認為二倍體,PIK3CA c.1633G>A(E545K)、TP53 c.916C>T(R306*)、NRAS c.34G>T(G12C)、PTEN c.795delA(K267fs*9)和MAP2K1/MEK1 c.199G>A(D67N)變體的野生型和PIK3C、TP53、NRAS的純合野生型,PTEN、MAP2K1/MEK1。
f、 將所需量添加到化驗中。材料可以進一步稀釋(用無核酸酶水或合適的緩沖液),以達到適合您的檢測的DNA濃度。
g、 一級和二級標準應在同一測定中進行分析,以便為二級標準賦值。
NIBSC18/164國際標準品ATDB102基因組的DIN安瓿瓶有一個“容易打開”的彩色應力點,窄的安瓿柄與寬的安瓿體連接在一起。市場上有各種類型的安瓿破瓶器。要打開安瓿,輕輕敲擊安瓿以收集底部(貼有標簽)端的材料,并遵循安瓿斷路器提供的制造商說明。
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